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上海應(yīng)物所揭示自組裝DNA納米結(jié)構(gòu)的細胞過程

 DNA納米技術(shù)為納米藥物載體、納米機器人研究提供了一系列強大的工具,已逐漸成為一種納米醫(yī)學(xué)研究的熱點。近日,中國科學(xué)院上海應(yīng)用物理研究所物理生物學(xué)研究室及上海光源生物成像中心樊春海和黃慶研究員合作,應(yīng)用一系列先進的細胞顯微成像技術(shù)并結(jié)合生物化學(xué)手段,清晰展示了一類自組裝DNA四面體結(jié)構(gòu)在活細胞中的攝取與轉(zhuǎn)運過程,為其在藥物載運和治療方面的應(yīng)用奠定了良好的基礎(chǔ)。相關(guān)研究結(jié)果以封面論文的形式發(fā)表于《德國應(yīng)用化學(xué)》雜志(Angew. Chem. Int. Ed. 2014, 53,7745-7750)。

  DNA不僅僅是生命的密碼,還可以作為制造納米級構(gòu)件和機器的通用元件。利用DNA分子的自組裝特性,DNA納米技術(shù)領(lǐng)域的研究者可以根據(jù)簡單的核酸堿基配對法則設(shè)計并在試管中構(gòu)造出精確而復(fù)雜的DNA納米結(jié)構(gòu)。在這個領(lǐng)域中,DNA往往被看作是一種非生物的材料而不是在活細胞中那樣作為遺傳信息的載體。盡管如此,由于自組裝DNA納米結(jié)構(gòu)具有卓越的生物相容性,近年來研究者對于其生物醫(yī)學(xué)應(yīng)用產(chǎn)生了越來越濃厚的興趣。DNA四面體結(jié)構(gòu)是一類重要的自組裝DNA納米結(jié)構(gòu)。2011年,樊春海和黃慶課題組在國際上首次報道了DNA四面體結(jié)構(gòu)可以作為一種納米尺度的藥物載體,將具有免疫刺激效應(yīng)的CpG寡核苷酸轉(zhuǎn)運進入細胞并刺激產(chǎn)生特定的細胞因子,有望成為一種免疫治療藥物(ACS Nano 2011, 5, 8783-8789)。之后,國際上多個課題組相繼報道了利用DNA納米結(jié)構(gòu)作為藥物載體的工作。然而,細胞膜具有負電性,通常會將同樣帶有負電荷的核酸分子屏蔽在膜外。而這些DNA納米結(jié)構(gòu)如何穿越細胞膜屏障而進入細胞內(nèi)則成為一個謎。

  經(jīng)過多年的努力,梁樂博士等研究人員利用全內(nèi)反射顯微鏡、單粒子示蹤等細胞成像技術(shù),實時觀察到了DNA四面體結(jié)構(gòu)穿過細胞膜并在胞內(nèi)運輸?shù)倪^程,并揭示了其最終命運。研究表明,DNA四面體結(jié)構(gòu)的細胞攝取是一種能量依賴的過程,在細胞膜上的小窩蛋白介導(dǎo)下產(chǎn)生內(nèi)吞,該過程可以在1分鐘內(nèi)完成。隨后,DNA四面體結(jié)構(gòu)通過由微管蛋白構(gòu)成的細胞骨架系統(tǒng)進行運輸,并最終到達溶酶體而被降解。有意思的是,當DNA四面體結(jié)構(gòu)被連接上信號肽分子后,還可以改變細胞命運。例如載有核定位序列NLS的DNA四面體結(jié)構(gòu)可以從溶酶體中逃逸出來而進入細胞核內(nèi)。以上研究表明,當DNA分子組裝成納米結(jié)構(gòu)后,可以像病毒一樣借用細胞本身的轉(zhuǎn)運系統(tǒng)“侵染”細胞,這為研制納米機器人最終實現(xiàn)納米診療提供了新的可能。

上海應(yīng)物所揭示自組裝DNA納米結(jié)構(gòu)的細胞過程