標題:游離甲狀腺素(FT4)定量測定試劑盒(化學發(fā)光法)
【生產(chǎn)廠家】廈門市波生生物技術有限公司
【批準文號】國藥準字S20050054
【劑 型】試劑盒
【規(guī) 格】96人份
【醫(yī)保類型】
【國家基本藥物】否
【英文名】The Quantitative Determination Kit for Free Thyroxine（FT4）with Chemiluminescent Immunoassay（CLIA）
【漢語拼音】Youli Jiazhuangxian Su（FT4）Dingliang Ceding Shiji He(Huaxue Faguang Mianyi Fa)
【使用目的】
用于人血清、血漿（肝素抗凝）中游離甲狀腺素(FT4)的定量測定。
FT3、FT4是甲狀腺激素發(fā)揮活性作用的形式。循環(huán)中的TT4，99.97%與血液中的TBG、白蛋白和前白蛋白結合，游離的只占0.02-0.04%。T4參與維持和調節(jié)機體的新陳代謝功能。
FT4的測定能反應甲狀腺功能狀態(tài)，F(xiàn)T4適用于甲狀腺功能狀態(tài)的輔助診斷。
【試驗原理】
采用競爭一步化學發(fā)光免疫法。樣品、T4-堿性磷酸酶（T4-ALP）標記物加到包被有羊抗T4多克隆抗體的白色微孔條板微孔中。反應足夠時間后，血清中FT4及T4-堿性磷酸酶與固相抗體競爭性結合，洗掉游離成分。加入發(fā)光底物液，ALP催化底物脫磷酸基,并發(fā)出463nm的可見光。于第10-20分鐘測定各加樣品孔的發(fā)光值RLU。樣品的RLU與其對應的FT4濃度呈負相相關。樣品中的FT4濃度依據(jù)由校準品FT4濃度和對應的RLU建立的四參數(shù)方程進行定量。
【試劑主要組成成分】
1. FT4預包被板(山羊抗T4多克隆抗體) 6×8，12×8
2. T4-ALP標記物（T4標記堿性磷酸酶） 1瓶,3.0ml/瓶或5.5ml/瓶
3. FT4校準品 0、1.5、4.5、25、70、120pmol/L 各一管，0.5ml/管
4. FT4質控物（Q1、Q2） 各一管，0.5ml/管
5.濃縮清洗液（20×） 1瓶，20ml/瓶
6.發(fā)光底物液 1瓶,3.0ml/瓶或5.5ml/瓶
7.說明書 1份
8.自封袋 1個
【適用儀器】
適用于具備如下性能指標的發(fā)光測定儀:
1.孔間交叉<3×10-5；
2.線性測定(線性回歸,|r|>0.9900)范圍1×105；
3.本底讀數(shù)<150,最高RLU讀數(shù)>1×106；
4.于29℃室溫環(huán)境,最低檢出量≤2.67×10-18M ALP；
5.96孔連續(xù)讀數(shù)完成時間:150秒≤96孔讀數(shù)完成時間≤200秒。
【樣本要求】
1.所用樣品為血清或肝素抗凝血漿；
2.樣品必須是過夜禁食(12小時)后空腹采集,并在采集后的24小時內分離畢；
3.樣品應充分離心,不應有溶血及細胞顆粒；
4.樣品在2～8℃環(huán)境密封,可保存7天供待檢；不能及時檢測,可密封置-20℃存放保存1年。
【試驗方法】
1.準備：自2～8℃冰箱取出試劑，室溫平衡15分鐘；濃縮清洗液用煮沸并預冷至室溫（不超過7天）的純化水按1：20稀釋成工作液。
2.加樣品、校準品、質控物及T4-ALP標記物：樣品、質控物及校準品分別定位于相應孔，每孔加樣50ul，再于各孔加T4-ALP標記物50ul，混勻，置37℃恒溫反應60分鐘。
3.洗板：吸除板孔中的反應液，各孔加入洗液約300ul，靜置20秒左右，除去其中液體。如此共洗5次,最后一遍將板中液體拍盡。
4.加發(fā)光底物液：開啟發(fā)光測定儀及主控制計算機,預熱15分鐘。設定測定模式與參數(shù)。將微孔板置發(fā)光測定儀測定室，用內置加樣器加發(fā)光底物液，每孔50ul。詳見發(fā)光測定儀操作指南。
5.測定RLU：于室溫25℃左右,設定每孔測定1秒鐘。在加發(fā)光底物液后的第10-20分鐘測定各孔的發(fā)光值RLU。并將數(shù)據(jù)轉至定量軟件。
6.定量方法:根據(jù)各校準品測定的RLU，用四參數(shù)方程建立FT4濃度—RLU的回歸方程和繪制校準曲線。根據(jù)各樣品RLU值，由定量軟件直接計算轉換成其相應的FT4濃度。存入FT4文檔，再輸入至病人的檢測報告單。
【對試驗結果的解釋】
根據(jù)正常值范圍判定標本結果，若測定值在正常值范圍內則為正常，若測定值高于正常值則為甲亢可能病例，若測定值低于正常值則為甲減可能病例。最終診斷應結合臨床癥狀來確立。
正常參考值范圍(95%正常值范圍):8.4-32pmol/L。各實驗室應建立本方法FT4正常值范圍。
【該試驗方法的局限性】
1.樣品FT4測定濃度高于或低于正常參考值范圍,應排除生理性的變化或應激反應等狀態(tài)。確實異常，應結合臨床癥狀診斷。
2.本法測定結果僅適合于用本方法建立的正常值范圍來判定，與其他方法結果無直接可比性。
【產(chǎn)品性能指標】
1.測定范圍 1.2-120pmol/L
2.檢測限 1.2pmol/L
3.特異性
3.1交叉反應 T3<0.01%,rT3<0.01%
FT4 CLIA試劑特異性
交叉因子 交叉因子濃度 相當于FT4濃度（pmol/L） 交叉率
Tb>3 92166pmol/L <2pmol/L <0.01%
rT3 92166pmol/L <2pmol/L <0.01%
3.2干擾試驗
FT4 CLIA試劑干擾試驗
干擾物 濃度干擾率
血紅蛋白 1000mg/dL -0.99%
甘油三脂 200mg/dL 4.74%
膽紅素 20mg/dL 2.06%
甲狀腺素結合蛋白(TBG) 0.48mg/dL 1.11%
人血白蛋白 5000mg/dL 0.57%
4.精密性
FT4 CLIA試劑分析內精密性
FT4質控物 均值(pmol/L)(n=10) 標準差SD(n=10) CV(%)
QCI 8.033 0.975 12.133
QCII 16.409 1.767 10.768
QCIII 68.722 6.554 9.537
FT4 CLIA試劑分析間精密性
FT4質控物 均值(pmol/L)(n=30) 標準差SD(n=30) CV(%)
QCI 7.957 1.022 12.841
QCII 16.793 1.854 11.043
QCII 68.302 7.343 10.751
5.與其他方法（試劑）的比較
5.1 FT4 CLIA試劑與RIA試劑的相關性比較
yCLIA=0.915XRIA+2.3677，a=2.3677，b=0.915，r=0.9832，n=200。
5.2 FT4 CLIA試劑與Abbott FT4 Axsym試劑的檢測結果相關性比較
yCLIA=1.0025XAxsym+1.391，a=1.391，b=1.0025，r=0.9659，n=120。
6 樣品稀釋情況 無需稀釋
7 環(huán)境污染 無
8.可疑結果的處理 建議重復試驗
【注意事項】
1.檢測結果的質量控制
1.1平行檢測質控物Q1、Q2，結果應在Q1 5.78-12.32pmol/L,Q2 26.68-41.41pmol/L范圍內；
1.2校準品曲線線性相關系數(shù)|r|≥0.9900；
1.3校準品發(fā)光值遞進比
校準品發(fā)光值各劑量遞進比允許范圍
劑量組比 99%可信限范圍
0/1.5 1.09-1.53
1.5/4.5 1.38-1.56
4.5/25 2.98-4.36
25/70 2.35-3.30
70/120 1.54-1.90
各劑量組發(fā)光值遞進比應在此99%可信區(qū)間范圍內。
2.本品僅供體外診斷用。
3．試劑啟用后應盡快用完，不同批號試劑組分請勿混用。用時請將瓶內容物混勻。
4.免疫反應過程中，務必保持溫度恒定準確，控制于37℃。
5.稀釋濃縮洗液的純化水，用煮沸并預冷至室溫（不超過7天）的純化水。
6.洗板機洗板，每孔注液約300ul，洗板5次，浸泡20秒左右，并檢查加液頭是否堵塞。
7.手工洗板，勿用帶紙屑的吸水材料，防止磷酸酶與底物發(fā)生反應，影響檢測結果的準確性。
8.手工加發(fā)光底物的加樣器吸量應準確，加樣器頭應經(jīng)過高壓滅菌，并干燥保存。在加發(fā)光底物的過程中應避免加樣器吸頭與板孔或手指接觸，以防止底物受到污染。
9.用發(fā)光測定儀自動進樣器加發(fā)光底物時,每天應用空白廢棄條一孔檢測加樣體積是否為設定的50ul,如不夠,應該使用Prime功能排氣,確保加樣體積準確。
10.發(fā)光測定儀完成加發(fā)光底物模式后,應立即將模式設定為讀RLU模式,以防止重復加發(fā)光底物。
11.臨床標本均應視為有潛在傳染性，請按傳染疾病實驗室檢查規(guī)程操作。
12.每個實驗室在長期實踐中應建立自己的正常值范圍。
【包裝、規(guī)格】
48人份/盒；96人份/盒。
【貯存】
2～8℃，避光防潮。
【有效期】
12個月。
【批準文號】
【生產(chǎn)企業(yè)電話與傳真】
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